在处理血浆或组织样本时，你是否遇到过这种怪事：标准曲线做得完美无缺，但到了真实样本，内标响应却开始乱跳，甚至出现目标物信号被莫名“吃掉”的情况？

其实，幕后真凶往往就是那些在蛋白沉淀过程中“漏网”的——磷脂（Phospholipids）。

一、 为什么是磷脂？

磷脂是生物样本中含量极高的内源性组分。它们在电喷雾电离（ESI）源中具有极强的表面活性，会优先占据液滴表面，从而剧烈抑制目标化合物的离子化。最麻烦的是，磷脂在色谱柱上的保留极强，往往不会在当前针洗脱，而是在下一针甚至下几针随机强力洗脱，造成毫无规律的信号抑制。

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二、 专家秘籍：开启 m/z 184 “雷达”通道

如何判断你的色谱梯度是否已经洗脱了磷脂？不需要盲目延长冲洗时间，你只需要在质谱方法中加一个监控通道。

绝大多数甘油磷脂（如磷脂酰胆碱 PC）和鞘磷脂（SM）在正离子模式碰撞诱导解离（CID）下，都会产生一个极其特征的碎片离子：m/z 184.1。这是磷酸胆碱头部的特征信号。

操作步骤：

建立监测通道： 在你的 MRM 方法中，手动添加一对试验通道（例如 m/z 496 → 184，524 → 184，704 → 184, 758 → 184, 787 → 184，806 → 184，811 → 184，针对不同磷脂通道）。

当然，你也可以输入184 → 184，基于源内裂解，进行磷脂检测。

之后可以，考察不同前处理方式下，磷脂的出峰强度，峰型（往往不成峰，像绵绵不断的山），并重点关注：磷脂出峰位置是否和关键目标物重叠。

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三、 实战价值：避开“地雷区”

通过监控磷脂通道，你可以获得三个至关重要的决策依据：

1）判定洗脱平衡： 如果 m/z 184 的大包峰出现在你的目标物出峰位置，必须调整梯度，或者更换极性更大的（或道理类似的）色谱柱，将两者拉开。

2）优化冲洗梯度： 如果你发现 m/z 184 信号在梯度结束时还没回到基线，说明你的强洗溶剂比例不够或冲洗时间太短。这正是导致批内或批间差异的根源。也是导致色谱柱柱效下降的原因之一。

评价前处理效率： 对比 PPT 和 SPE，通常，你会发现 m/z 184 的峰面积差异巨大（不同的SPE去除效率不同， 有些方法和产品，宣传去除 99% 以上的磷脂。）。如果分析物灵敏度极高，这能说服老板投入更高成本的前处理耗材。

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四、 避坑指南

不要用它做定量： 184 通道仅用于定性监控。由于磷脂种类繁多，这个信号是成百上千种磷脂贡献的总和。

注意污染： 长期高浓度的磷脂进入质谱会导致离子源锥孔污染，建议在不含目标物的时间段通过切换阀将废液切出。

仍要注意：不是说使用了SPE或类似效果的产品，就不用在关注磷脂了。举个例子，针对体内约200 mg/DL级别的磷脂含量，即使只剩下1%的磷脂，也是接近微克级别的存在。