步骤1：亲核攻击
氨基（-NH2）中的氮原子孤对电子攻击羰基（C=O）中的碳原子，形成过渡态。

步骤2：形成半缩胺
羰基碳与氨基氮形成单键，同时羰基氧原子接受一个质子（H⁺），生成半缩胺（hemiaminal）中间体。

步骤3：脱水形成席夫碱
半缩胺不稳定，容易脱水（失去一分子水），生成席夫碱（Schiff base，R-N=CH-R'）。席夫碱是一种含有亚胺（C=N）结构的化合物。

反应通式如下：

不可逆性：席夫碱的形成通常是不可逆的，尤其是在色谱条件下（如室温或稍高温度）。这意味着氨基柱的固定相会永久性受损。

快速性：氨基与醛类、酮类的反应速度较快，尤其是在弱酸性或中性条件下。

普遍性：几乎所有含有游离氨基的固定相都会与醛类、酮类发生类似反应。

固定相破坏：氨基与醛类、酮类反应后，固定相的结构发生改变，导致其分离能力下降。

柱效降低：反应产物（如席夫碱）可能堵塞柱子的孔隙，增加背压，导致柱效降低。

保留时间漂移：固定相的改变会导致化合物的保留时间不稳定，影响分析结果的重复性。

不可恢复：由于反应不可逆，受损的氨基柱无法通过清洗或再生恢复。