下图红框的已知杂质峰形较差

从峰形上判断：

1、可能是溶剂效应；

2、也有可能是结构互变；

以及按碱或高温改善羰基类的马鞍峰或前沿峰一文，升高柱温没有改善。

如上述操作没有改善，再看一下杂质结构为一对映异构体，见下图，

峰形差可能是这一对映异构体在反相中没有完全重叠，也即C18可以识别这组对映异构体。

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XTerra MS C18 和Purospher RP-18的性能对比见下表，Fs大于5则两根柱子的效能有差异。Fs为103.5说明两者有显著差异(不等效)。应用在本例，XTerra能识别对映异构体，Purospher无法识别（对映异构体完全重叠)

根据两种柱子的色谱行为，尝试分析色谱柱的参数

1、疏水性（H），对于疏水性更强的色谱柱，H 增加可使疏水性（极性较小）溶质、的保留增加。XTerra的H值为0.98略大于Purospher的(0.84），本例中两种柱子的保留时间相差不大（10分钟 VS 8分钟）

C18可以识别这组对映异构体，有可能是疏水性起决定性作用。这是下文结论的假设

2、氢键酸度（A），具有较大 A 值的色谱柱可提高氢键受体溶质（例如脂肪族酰胺）的保留时间，作用力见下图。本例结构有仲胺和叔胺，Purospher的A作用力大于XTerra，但是这个作用力在对映异构体理论上似乎无法识别

3、氢键碱度（B），B 值较大的色谱柱对作为氢键供体的溶质（例如，酚类、羧酸）的保留增加，作用力见下图。氢键作用越强，对酸性化合物保留增加。XTerra的B值为-0.01与Purosphe的B值为0.3，本例有多个羧酸在中性条件下COOH已解离为COO-，似乎作用力不大

4、C值，具有较大负电荷（电离硅烷醇）和产生较大 C 值的色谱柱可提高质子化碱的保留时间并降低电离酸的保留时间。C 值是针对 pH 2.8 和 pH 7.0 给出的。XTerra的C值为0.05与Purospher的C值为0.9，中性条件C值呈负电（大于0呈负电）。本例结构有多个羧基也呈负电，中性条件下似乎C作用力不大，不像这个案例色谱柱C值: 蕴藏的离子力为正负电相互吸引

5、位阻选择 (S)，较大的位阻空间，使大体积的溶质分子渗透到固定相。

XTerra的S值为0.01与Purospher的S值为0.23，

这个杂质的分子量为500+有空间位阻，

空间位阻的洗脱原理如抗生素的聚合物研究简介一文（见下图），

类似G10色谱柱为大分子(共同或接近的分子量)共同出峰，

对映异构体峰重叠说明空间位阻S与疏水性H之间的竞争中S起决定性作用。